Типовая ситуация

Слабый сигнал ДНК и задержка внутреннего контроля

Если экстракт с поверхности предмета дал слабый сигнал ДНК, результат могут объяснить отсутствием биологического материала. При этом внутренний контроль амплификации мог сработать позже контрольных проб. Следует проверить возможное ингибирование реакции, сохранив часть экстракта и не расходуя весь след на повторение одной процедуры без оценки причин.

Что нужно выяснить

Проверить, согласуется ли слабый сигнал с данными контроля ингибирования, и оценить допустимость повторной подготовки либо разведения экстракта в пределах валидированной лабораторной процедуры исследования.

Какие материалы подготовить

  • Сохранённый экстракт и доступный остаток исходного следа
  • Кривые количественной ПЦР с внутренним и отрицательными контролями
  • Протокол выделения и валидационные критерии применённых тестовых систем

Что сопоставить

Сравнивают кривые и задержку внутреннего контроля с критериями системы, проверяют холостые пробы и объёмы внесения. Если материала достаточно, сопоставляют исходный экстракт с допустимым разведением или повторной очисткой. Учитывают снижение количества ДНК при разведении и различную чувствительность количественного теста и последующей STR-реакции к ингибиторам.

Возможный результат разбора

Возможен протокол оценки качества экстракта с обоснованием выбранной подготовки и описанием пригодности полученных данных для дальнейшей интерпретации, включая условия, при которых ответ ограничен.

Границы выводов

Контроль ингибирования не определяет личность донора и не гарантирует получение профиля. Отсутствие сигнала не доказывает отсутствие контакта, а разведение может усилить случайные эффекты.